Deteccióndealérgenos de cacahuete…
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3.4.Optimizaciónde lamonocapa
Con el objetivo de optimizar la composición de la monocapa se realizaron
dos diseños factoriales completos 3
2
, ya descritos en el apartado Diseño
estadístico, siendo las variables independientes las concentraciones de sonda de
capturaydeMCH. Enel primerodeellos seutilizóuna concentracióndeanalitode
10 nM. El diagrama de Pareto (Figura 4.A)muestra la influencia de las variables y
sus interacciones en la respuesta del sensor, siendo el efecto cuadrático de ambas
variables el de mayor influencia en la respuesta. El efecto individual de las
variables muestra una influencia menor, siendo positivo el efecto del MCH y
negativo el efecto de la sonda de captura. El modelo matemático obtenido
correspondea la función
S
analito
(A) = 5,22737×10
-‐6
+ 4,98504×10
-‐6
[
sonda captura
]
+ 5,97693×10
-‐6
[
MCH
]
-‐ 4,50416×10
-‐6
[
sonda
captura
]
2
+1,54737×10
-‐6
[
sonda captura
][
MCH
]
-‐ 1,4×10
-‐6
[
MCH
]
2
La Figura 4.B muestra los efectos principales sobre la intensidad de
corrienteproducidospor lasdosvariables. En laFigura4.Csemuestra lasuperficie
de respuesta y en la Figura 4.D las correspondientes curvas de nivel proyectadas
en el plano formado por los dos factores. Estas curvas de nivel muestran las
condiciones experimentales para las que se obtiene el valormáximo de respuesta
así como un espacio próximo al óptimo con la misma respuesta para distintas
condiciones experimentales, pudiendo elegir de toda la zona los valores de los
factoresmás convenientes según otros criterios económicos de tipo coste, tiempo,
etc. Estemáximovienedefinidopor los valores óptimos de los factores implicados
queresultaronser1μMdesondadecapturay2,5mMdeMCH.
Figura 4.-‐
Resultados del diseño factorial 3
2
con analito 10 nM, (A) diagrama de Pareto
estandarizadopara intensidadde corriente, (B) gráficadeefectosprincipalespara la intensidad, (C)
superficiede respuestay (D) curvasdenivel.
5
Intensidad (A)
[
MCH
]
*
[
MCH
]
[
sondacaptura
]
*
[
sondacaptura
]
[
sondacaptura
]
*
[
MCH
]
[
sondacaptura
]
[
MCH
]
Intensidad (A)
[
Sondacaptura
]
[
MCH
]
Efectoestandarizado
(A)
(B)
(C)
(x10
-6
)
(x10
-6
)
4
1.6
0.8
3.2
5.6
8
10.4
12.8
15.2
17.6
20
Intensidad (
µ
A)
[
sondacaptura
]
[
MCH
]
(D)