Deteccióndealérgenos de cacahuete…
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Con el objetivo de conocer la señal debida exclusivamente al analito, se
generó una nueva variable
diferencia
(señal del analito – señal del blanco). El
modelomatemáticoobtenidocorrespondea laecuación
S
analito
-‐S
blanco
(A) =4,39816×10
-‐6
+ 5,13019×10
-‐6
[
sond c ptura
]
+ 6,17592×10
-‐6
[
MCH
]
-‐ 4,49307×10
-‐6
[
sonda captura
]
2
+1,51579×10
-‐6
[
sonda captura
][
MCH
]
-‐ 1,42×10
-‐6
[
MCH
]
2
En la Figura 6 se muestran la superficie de respuesta para el analito, el
blanco y la
diferencia
y la curva de nivel para la diferencia en la Figura 6.D. Los
valores óptimos prácticamente coincidieron con los obtenidos previamente, 1μM
de sonda de captura y 2,5mMdeMCH, ya que la señal obtenida por el blanco, en
estas condiciones, es prácticamente despreciable frente a la obtenida con el
analito. Reducir los valores del blanco es uno de los principales objetivos en estos
dispositivos analíticos, para así aumentar la relación señal/blanco y, como
consiguiente, el límite de detección. Los blancos obtenidos en estas condiciones
experimentaleshacenque larelaciónS/Baumentedemaneraapreciable.
Figura 6.-‐
Curvas de superficie de respuesta: (A) 10 nMde analito, (B) blanco y (C) diferencia 10
nManalito-‐blanco. (D)Curvadenivel para lavariable
diferencia
.
3.5. Curvadecalibradoyestudiodereproducibilidad
Se realizó una curva de calibrado, bajo las condiciones experimentales
óptimas obtenidas de los diseños de experimentos, 1µMde sonda de captura y 2,5
mM de MCH. Se observó una relación lineal entre la intensidad de corriente y la
concentración de analito, con un intervalo lineal de 1
⋅
10
-‐10
a 1 10
-‐7
M (Figura7),
una ecuación I (A) =2
⋅
10
-‐6
C (nM) +4
⋅
10
-‐6
, y un coeficiente de regresión: r=0,998.
El límite de detección resultó ser 50 pM. Para la reproducibilidad se midió la
respuesta de una disolución de analito 10 nM en ocho electrodos diferentes, el
coeficientedevariaciónobtenido fue7,56%(n=8).
12
Itensidad (A)
(A)
(x10
-6
)
(B)
(x10
-6
)
Itensidad (A)
(C)
(x10
-6
)
Itensidad (A)
Itensidad (A)
4
1.6
0.8
3.2
5.6
8
10.4
12.8
15.2
17.6
20
Intensidad (
µ
A)
(D)
[
sondacaptura
]
[
MCH
]
