Efectos cardioprotectores de reducción de tamaño del infarto de miocardio…
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profilaxis analgésica (0,1 mg/kg), e infusión continua de amiodarona (150 mg en
500 ml de salino, a pasar en 12 horas) como profilaxis antiarrítmica.
2.3. Eutanasia
Inmediatamente tras la realización de RM y ecocardio, los animales fueron
sacrificados por inyección intravenosa de cloruro de potasio (20 mEq inyectados a
través del acceso venoso central en la vena femoral), se extrajeron los corazones y
se realizaron siete cortes del mismo grosor a lo largo del eje corto del VI. Se
recogieron muestras de tejido de la zona de la cicatriz, borde y remota, parte se
incluyó y congeló en medio OCT (TissueTek, California) para los estudios
histológicos y parte se congeló para el análisis molecular. Visualizamos el tamaño
final del infarto en los cortes restantes a través de la tinción con cloruro de 2,3,5-
trifenil tetrazolio (TTC) y se tomaron imágenes de alta resolución pudiendo
diferenciar el área del infarto (blanco) y el miocardio normal (rojo). Las imágenes
se cuantificaron utilizando el software Image J (National Institutes of Health,
Bethesda, MD). El volumen de infarto se expresó como porcentaje del volumen
total del miocardio.
2.4. Imagen cardiaca por resonancia magnética
Los estudios por resonancia magnética (RM) se realizaron en un equipo de
RM de 3.0 Tesla (Achieva, Philips Medical System, Netherlands). Se realizó una
secuencia de cine en el eje corto del VI (TR 3,6 ms, TE 1,6 ms, flipangle 45º, campo
de visión 250 x 250 mm)desde la base hasta el ápex del VI para la cuantificación de
los volúmenes, masa y fracción de eyección del VI (FEVI). A continuación
realizamos una secuencia spin echo potenciada en T2(STIR, TR 2-3 latidos, TE 60
ms, TI 210 ms, campo de visión 250 x 250 mm, SENSE factor 3) para la medida del
edema y determinación del área en riesgo (AAR). Realizamos realce tardío de
gadolinio 15 minutos después de la administración del gadolinio (Magnevist, 0,2
mmol/kg) usando una secuencia de inversión-recuperación (TR 9 ms, TE 5,4 ms, TI
optimizado para anular el miocardio sano, campo de visión 250 x 250 mm).
Después del realce tardío, infundimos dobutamina a 5µg/kg/min y repetimos la
secuencia SSFP para la determinación de la reserva contráctil.
Todas las imágenes de RM fueron analizadas de manera ciega usando un
software comercial (Extended MR Workspace, Philips Medical Systems,
Netherlands). Se trazaron los contornos del epicardio y del endocardio en cada una
de las imágenes SSFP para la obtención de los volúmenes sistólicos y diastólicos
finales (LVEDV y LVESV), FEVI y la masa del VI; por convención, los músculos
papilares se incluyeron en la cavidad del VI. Para la determinación del AAR y de
tamaño de IAM se delimitaron manualmente los bordes epicárdicos y endocárdicos
de cada uno de los cortes del eje corto en las secuencias STIR e inversión-
