E.M. González-‐Burgos&al.
370
A)
MDA
(nmoles /mg proteína)
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
1,2
1,4
5
µ
M
10
µ
M
H2O2
Andalusol
Control
H2O2 (0,1mM)
**
# #
##
MDA
(nmoles /mgproteína)
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
1,2
1,4
5
µ
M
10
µ
M
H2O2
Linearol
Control
H2O2 (0,1mM)
**
# #
# #
B)
MDA
(nmol / mg proteína)
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
5
µ
M
10
µ
M
H2O2
Andalusol
Control
H2O2 (1mM)
*
# #
MDA
(nmol /mgproteína)
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
5
µ
M
10
µ
M
H2O2
Lagascatriol
Control
H2O2 (1mM)
*
# #
Figura 2.-‐ Efecto sobre la peroxidación lipídica.
El grado de peroxidación lipídica se cuantifica
midiendo los niveles de MDA en los extractos celulares totales por HPLC. Los resultados se
expresancomonmoles/mgproteína. Los resultados seexpresancomomedia±DesviaciónEstándar
de tres experimentos independientes. *
p
< 0,05 y **
p
< 0,01
versus
control;
#
p
< 0,05 y
##
p
< 0,01
versus
H
2
O
2
.
La activación de las enzimas antioxidantes es otro de los mecanismos que
explica la acción de los compuestos antioxidantes. Cambios en los patrones
enzimáticos de catalasa (CAT), superóxido dismutasa (SOD), glutation peroxidada
(GPx), glutation reductasa (GR) y hemooxigenasa-‐1 (HO-‐1), entre otras, se
traducen en variaciones del balance redox celular, constituyendo, por tanto, un
biomarcador esencial del estrés oxidativo (32, 33). Así, con objeto de profundizar
enel/losmecanismosdeacciónde losditerpenosdel presente trabajo, procedimos
a estudiar el papel de estos compuestos en la actividady expresiónde las enzimas
antioxidantes, mediante técnicas espectrofotométricas y de Western-‐blot,
respectivamente. En nuestro trabajo, el tratamiento de las células con H
2
O
2
produce una significativa disminución tanto en la actividad como en la expresión
de las enzimas anteriormente mencionadas. El pretratamiento celular con los
diterpenosde
Sideritis
produceunaumentode la actividadyde la expresiónde las
enzimas antioxidantes endógenas evaluadas (excepto foliol en células PC12 y
conchitriol y foliol en células U373-‐MG), comparado con las células expuestas a
H
2
O
2
comoúnico tratamiento. En laFigura3, semuestra comoejemplo laactividad
y la expresión para la enzima catalasa y los compuestos andalusol, conchitriol y
lagascatriol.
