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Paloma Santos-Moriano et al
como consecuencia de una hidrólisis ácida haciendo imposible el análisis de los datos (resultados no incluidos).
Tabla 4. Rendimiento de la inmovilización de LEV en alginato cálcico. La actividad se midió en dos puntos durante la inmovilización:
tras la incubación con TG y tras la inmovilización.
Rendimiento de incubación * Rendimiento de inmovilización Rendimiento total
LEV 58% 94% 55%
LEV + TG 59 % 92% 54%
* Tras 2 h de incubación con TG a 35ºC pH 5.6 600 rpm
Figura 9. Estabilidad operacional de los biocatalizadores de alginato. A. Actividad residual de las bolas de alginato de LEV inmovilizada
a pH 4.0 a pH 5.6 y LEV inmovilizada previamente entrecruzada con TG a pH 5.6 tras varios ciclos de reacción con sacarosa 600 g/l. B.
Actividad residual de los DALGEEs de LEV a pH 5.6 y LEV + TG tras varios ciclos de reacción con sacarosa 600 g/l.
realidad mayor que la que se calcula con un solo ensayo de
3.5. Producción de fructooligosacáridos por la DNS. Sin embargo lo que parece bastante claro es que la
levansacarasa inmovilizada enzima es capaz de consumir casi toda la sacarosa presente
en la reacción y permanece activa incluso después de 129
Una vez que la enzima estuvo inmovilizada se h de reacción (datos no mostrados). No hubo diferencias
estudiaron reacciones en las mismas condiciones que con significativas entre los productos formados por LEV
la enzima soluble y las muestras se analizaron por inmovilizada sola y LEV previamente entrecruzada con
HPAEC-PAD. Básicamente se formaron los mismos TG aunque se pudo observar un ligero aumento en la
productos que con la enzima soluble solo que en distinta producción de FOS en la estrategia con TG que tenían una
proporción (Figura 7 círculos negros y blancos). Además tasa de transfructosilación/ hidrólisis de 1.8.
las reacciones con biocatalizadores inmovilizados parecían
ir más rápidas a pesar de haber puesto las mismas La producción de FOS con LEV inmovilizada alcanzó
unidades. Esto pudo ser causado por el efecto observado su máximo cuando casi toda la sacarosa se había
en el ensayo de lixiviación por el cual la actividad consumido (Figura 10B) y la tasa de transfructosilación
aumentaba tras el primer ciclo de reacción. hidrólisis era de 1.6. Una vez que la conversión de
sacarosa fue total la concentración de 1-kestosa y
Aunque inicialmente ambas reacciones (con la enzima neokestosa empezó a caer (Figuras 7A y 7C) mientras que
soluble e inmovilizada) se estudiaron con el mismo la concentración de 6-kestosa parecía aumentar (Figura
número de unidades de LEV por ml este efecto puede 7B). Esto indica que probablemente LEV está actuando
haber causado que la actividad de los DALGEEs fuera en
58 @Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
como consecuencia de una hidrólisis ácida haciendo imposible el análisis de los datos (resultados no incluidos).
Tabla 4. Rendimiento de la inmovilización de LEV en alginato cálcico. La actividad se midió en dos puntos durante la inmovilización:
tras la incubación con TG y tras la inmovilización.
Rendimiento de incubación * Rendimiento de inmovilización Rendimiento total
LEV 58% 94% 55%
LEV + TG 59 % 92% 54%
* Tras 2 h de incubación con TG a 35ºC pH 5.6 600 rpm
Figura 9. Estabilidad operacional de los biocatalizadores de alginato. A. Actividad residual de las bolas de alginato de LEV inmovilizada
a pH 4.0 a pH 5.6 y LEV inmovilizada previamente entrecruzada con TG a pH 5.6 tras varios ciclos de reacción con sacarosa 600 g/l. B.
Actividad residual de los DALGEEs de LEV a pH 5.6 y LEV + TG tras varios ciclos de reacción con sacarosa 600 g/l.
realidad mayor que la que se calcula con un solo ensayo de
3.5. Producción de fructooligosacáridos por la DNS. Sin embargo lo que parece bastante claro es que la
levansacarasa inmovilizada enzima es capaz de consumir casi toda la sacarosa presente
en la reacción y permanece activa incluso después de 129
Una vez que la enzima estuvo inmovilizada se h de reacción (datos no mostrados). No hubo diferencias
estudiaron reacciones en las mismas condiciones que con significativas entre los productos formados por LEV
la enzima soluble y las muestras se analizaron por inmovilizada sola y LEV previamente entrecruzada con
HPAEC-PAD. Básicamente se formaron los mismos TG aunque se pudo observar un ligero aumento en la
productos que con la enzima soluble solo que en distinta producción de FOS en la estrategia con TG que tenían una
proporción (Figura 7 círculos negros y blancos). Además tasa de transfructosilación/ hidrólisis de 1.8.
las reacciones con biocatalizadores inmovilizados parecían
ir más rápidas a pesar de haber puesto las mismas La producción de FOS con LEV inmovilizada alcanzó
unidades. Esto pudo ser causado por el efecto observado su máximo cuando casi toda la sacarosa se había
en el ensayo de lixiviación por el cual la actividad consumido (Figura 10B) y la tasa de transfructosilación
aumentaba tras el primer ciclo de reacción. hidrólisis era de 1.6. Una vez que la conversión de
sacarosa fue total la concentración de 1-kestosa y
Aunque inicialmente ambas reacciones (con la enzima neokestosa empezó a caer (Figuras 7A y 7C) mientras que
soluble e inmovilizada) se estudiaron con el mismo la concentración de 6-kestosa parecía aumentar (Figura
número de unidades de LEV por ml este efecto puede 7B). Esto indica que probablemente LEV está actuando
haber causado que la actividad de los DALGEEs fuera en
58 @Real Academia Nacional de Farmacia. Spain
